超分辨技术(super-resolution)因其能够提供低于衍射极限的分辨率而获得了2014年诺贝尔化学奖。这一技术可分为两类:基于焦点调制的方法如STED,和基于单分子定位的方法,如PALM/STORM等。然而,这些方法虽然能获取很高的空间分辨率,却总是以牺牲时间分辨率为代价。同时,这些方法技术复杂、系统成本较高,这给推广应用带来一定困难。
在此项工作中,席鹏实验室将量子点、光谱方法、和基于光学涨落的超分辨技术(SOFI) 三种技术有机结合,在普通宽场显微镜镜上实现了3秒获得85nm超高时空分辨成像。通过联合标记(joint-tagging)的方法,使用多种不同荧光发射波长的量子点联合标记生物样品中的同一细胞结构,有效减少了在超高标记密度下高阶成像的伪影,更加真实地还原出所研究生物样品的完整结构和细节信息。而且,由于光谱离散的量子点更接近于单分子态,使得JT-SOFI能够大幅提高超分辨成像的速度,为超分辨成像研究活细胞的动态过程提供了全新的技术方法。
宽场成像和超分辨JT-SOFI成像的比较。Scale bar: 1 μm.
席鹏课题组博士生曾志平和陈轩泽为本文第一作者,席鹏为本文通讯作者。该项工作得到国家重大科学仪器设备开发专项基金、973国家重点基础研究发展计划和国家自然科学基金的资助。